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          Enzymatics P7050L 說明書

          更新時(shí)間:2018-04-11      點(diǎn)擊次數(shù):3912

           

          貨號(hào):P7050L

          品名:DNA Polymerase I(DNA聚合酶I)

          產(chǎn)品描述:

          DNA聚合酶I是一種嗜溫性DNA聚合酶,除3'→5'和5'→3'核酸外切酶活性外,還具有5'-3'DNA合成。DNA合成和5'→3'核酸酶特征的組合使DNA合成期間的缺口翻譯成為可能。

           

          規(guī)格:

          5,000 U

          濃度

          10,000 U/ml

          純度(SDS-PAGE)

          > 99%

          活性:

          6,850 U/mg

          SS核酸外切酶

          實(shí)用

          DS核酸外切酶

          實(shí)用

          DS內(nèi)切核酸酶

          200 U = no conversion

          大腸桿菌 DNA污染

          200 U <10 copies

           

          蛋白質(zhì)來源

          重組大腸桿菌菌株攜帶的POLA基因。

           

          提供

           

          25 mM Tris-HCl
          0.1 mM EDTA
          1.0 mM DTT
          50% glycerol
          pH 7.4 @ 25°C

           

          隨附:


          pB0110 (10X Blue Buffer)

          10X Blue Buffer (B0110)
          500 mM NaCl
          100 mM Tris-HCl
          100 mM MgCl2
          10 mM DTT
          pH 7.9 @ 25°C

           

          單位定義 
          1單位定義為在37℃30分鐘內(nèi)將10nmol dNTPs轉(zhuǎn)化為酸不溶性物質(zhì)所需的聚合酶量。

           

          質(zhì)量控制分析

           

          單位表征測(cè)定
          單位活性使用2倍系列稀釋法測(cè)量。在1X Blue反應(yīng)緩沖液中制備酶的稀釋液,并加入含有小牛胸腺DNA,1X藍(lán)色反應(yīng)緩沖液,3H-dTTP和100μMdNTP的50μL反應(yīng)物中。將反應(yīng)在37℃孵育10分鐘,在冰上沉降,并使用TCA沉淀法分析。

           

          蛋白質(zhì)濃度(OD 280)測(cè)量使用使用2.0mg / ml BSA樣品(Pierce Cat#23209)標(biāo)準(zhǔn)化的Nanodrop ND-1000分光光度計(jì)

          在OD 280處分析2.0μL酶樣品并用產(chǎn)品儲(chǔ)存溶液沖切。使用80,790的消光系數(shù)和103,118道爾頓的分子量將觀察到的3個(gè)重復(fù)樣品的平均測(cè)量值轉(zhuǎn)換成mg / mL。

          SDS-Page(物理純度評(píng)估)
          將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20%Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上,該凝膠側(cè)翼為寬范圍的MW標(biāo)記和2.0μL的樣品的1:100稀釋物。電泳后,將凝膠染色并比較??樣品以確定物理純度。該測(cè)試的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質(zhì)條帶的質(zhì)量,確認(rèn)濃縮樣品的純度大于99%。

          污染測(cè)試

          單鏈核酸外切酶活性

          將含有10,000cpm放射性標(biāo)記的單鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下孵育4小時(shí),導(dǎo)致TCA可溶性計(jì)數(shù)的釋放超過80%。

          雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標(biāo)記的雙鏈DNA底物的50μL反應(yīng)液和10μL在37℃下孵育4小時(shí)的酶溶液導(dǎo)致超過50%的TCA可溶性計(jì)數(shù)的釋放。


          雙鏈核酸內(nèi)切酶活性將含有0.5μgpBR322 DNA和10μL酶溶液的50μL反應(yīng)物在37℃下溫育4小時(shí),結(jié)果通過瓊脂糖凝膠電泳確定沒有肉眼可察覺地轉(zhuǎn)化為帶切口的環(huán)狀DNA。

          大腸桿菌  16S rDNA污染測(cè)試
          重復(fù)5μL酶溶液樣品變性,并在TaqMan qPCR測(cè)定中篩選污染性 大腸桿菌  基因組DNA,使用對(duì)應(yīng)于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測(cè)試的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)是由3個(gè)重復(fù)的無模板對(duì)照樣品的平均值產(chǎn)生的閾值循環(huán)計(jì)數(shù)(C t)。基于無模板對(duì)照 Ct  值與標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性,該測(cè)定的檢測(cè)限為<10拷貝基因組/樣品。

           

           

           

           

          部分產(chǎn)品信息:

          貨號(hào)

          品名

          規(guī)格

          濃度

          品牌

          N2070-10-L

           ATP Solution 

          50 µmol

          10 mM

          Enzymatics

          N2050-10-L

          10 mM dNTP Solution Mix

          100 µmol

          10 mM

          Enzymatics

          N2010L

          100 mM 75µmol dNTP Solution Set 

          75 µmol

          100 mM

          Enzymatics

          N2010-A-L

          100 mM dATP Solution 

          75 µmol

          100 mM

          Enzymatics

          N2050L

          100µmol dNTP Solution Mix 

          100 µmol

          25 mM

          Enzymatics

          Y9180L

          10x Uracil Cleavage System 

          750 Reactions

          N/A

          Enzymatics

          P7670

          2x HiFi PCR Master Mix 

          1 rxn

          2x

          Enzymatics

          Y9420L

          5x ER/A-Tailing Enzyme Mix 

          24 reactions

          N/A

          Enzymatics

          Y9380L

          E. coli Pyrophosphatase 

          50 U

          100 U/mL

          Enzymatics

          Y9030L

          E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein 

          1.5 mg

          2.75 mg/ml

          Enzymatics

          Y9140-HC-L

          End-Repair Mix (High Concentration) 

          75 Reactions

          1 Rxn/µL

          Enzymatics

          Y9140-LC-L

          End-Repair Mix (Low Concentration) 

          200 Reactions

          1 Rxn/µL

          Enzymatics

          Y9080L

          Endonuclease VIII 

          10,000 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

          P7600L

          EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-) 

          10,000 U

          200,000 U/mL

          Enzymatics

          X8010L

          Exonuclease I 

          30,000 U

          20,000 U/ml

          Enzymatics

          X8020L

          Exonuclease III 

          50,000 U

          100,000 U/ml

          Enzymatics

          P7010-HC-L

          Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration) 

          10,000 U

          50,000 U/ml

          Enzymatics

          P7010-LC-L

          Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration) 

          10,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7060L

          Klenow Fragment 

          2,500 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          X8030L

          Lambda Exonuclease 

          10,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7040L

          M-MuLV Reverse Transcriptase 

          100,000 U

          200,000 U/ml

          Enzymatics

          P7090L

          Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-) 

          3,000 U

          30,000 U/ml

          Enzymatics

          P7140-HC-L

          Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration) 

          100,000 U

          400,000 U/ml

          Enzymatics

          P7140-LC-L

          Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration) 

          100,000 U

          40,000 U/ml

          Enzymatics

          P7610L

          NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions 

          250 Reactions

          2X

          Enzymatics

          P7590L

          Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase 

          500 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7460L

          Poly(A) Polymerase 

          1,000 U

          5,000 U/mL

          Enzymatics

          Y9260L

          RecA 

          1.5 mg

          2.0 mg/mL

          Enzymatics

          Y9220L

          RNAse H 

          5,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          Y9240L

          RNAse Inhibitor 

          20,000 U

          40,000 U/ml

          Enzymatics

          L6010L

          T3 DNA Ligase 

          900,000 U

          3,000,000 U/ml

          Enzymatics

          L6030-LC-L

          T4 DNA Ligase 

          150,000 U

          120,000 U/ml

          Enzymatics

          L6030-HC-L

          T4 DNA Ligase (Rapid) 

          240,000 U

          600,000 U/ml

          Enzymatics

          P7080L

          T4 DNA Polymerase 

          2,000 U

          3,000 U/ml

          Enzymatics

          Y9130L

          T4 Gene 32 Protein 

          1.0 mg

          10 mg/mL

          Enzymatics

          Y9040L

          T4 Polynucleotide Kinase 

          10,000 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

          L6050L

          T4 RNA Ligase 1 

          10,000 U

          20,000 U/ml

          Enzymatics

          L6080L

          T4 RNA Ligase 2 

          4,500 U

          30,000 U/ml

          Enzymatics

          L6070L

          T4 RNA Ligase 2 Truncated 

          500 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          L6020L

          T7 DNA Ligase 

          900,000 U

          3,000,000 U/ml

          Enzymatics

          P7260L

          T7 DNA Polymerase 

          3,500 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

          P7180L

          T7 RNA Polymerase 

          50,000 U

          50,000 U/ml

          Enzymatics

          L6060L

          Taq DNA Ligase 

          20,000 U

          40,000 U/ml

          Enzymatics

          P7110L

          Taq DSC 2.0 DNA Polymerase 

          1,250 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7250L

          Taq-B DNA Polymerase 

          10,000 U

          5,000 U/ml

          Enzymatics

          P7620L

          TaqIT 

          5,000 U

          50,000 U/mL

          Enzymatics

          P7070L

          Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT) 

          6,000 U

          20,000 U/ml

          Enzymatics

          G5020L

          Thermolabile UDG 

          500 U

          1,000 U/ml

          Enzymatics

          Y9370L

          Thermostable Pyrophosphatase 

          1,250 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          G5010L

          Uracil DNA Glycosylase 

          10,000 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          P7511L

          VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase 

          500 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          P7520L

          VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase 

          500 U

          2,000 U/ml

          Enzymatics

          L6030-W-L

          WGS Ligase 

          24 Reactions

          N/A

          Enzymatics

          P7640L

          ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit 

          1000 Reactions

          N/A

          Enzymatics

          P7020-HC-L

          φ29 DNA Polymerase (High Concentration) 

          2,000 U

          100,000 U/ml

          Enzymatics

          P7020-LC-L

          φ29 DNA Polymerase (Low Concentration) 

          2,000 U

          10,000 U/ml

          Enzymatics

           

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          Enzymatics公司建立于2006年,專門從事開發(fā)、制造和分銷酶產(chǎn)品,致力于酶產(chǎn)品研發(fā),為市場(chǎng)帶來了特殊的、高品質(zhì)的產(chǎn)品。 Enzymatics公司建立了嚴(yán)格完整的操作體系,通過了ISO13485:2003和9001:2000體系標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證,并符合FDA 21 CFR.820質(zhì)量系統(tǒng)法規(guī)中對(duì)于常規(guī)用途試劑的生產(chǎn)規(guī)范。同時(shí)Enzymatics的生產(chǎn)能力被許多FDA認(rèn)證的醫(yī)療設(shè)備制造商以及的ISO認(rèn)證機(jī)構(gòu)TüV SüD 認(rèn)可。

           

           

          我們公司zui大優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的采購,

          1:基本什么都能進(jìn)口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進(jìn)口的,

          2:貨品全,現(xiàn)經(jīng)營過700多個(gè)品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口,特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢(shì),

          3:提供加急服務(wù),一般1-2周到貨,超過時(shí)限加急費(fèi)全免

          4:價(jià)格公道,絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì),當(dāng)然不能保證100%產(chǎn)品都是,因?yàn)橐馕吨鴽]有服務(wù).

          5:良好的信譽(yù),大部分客戶我們提供貨到付款服務(wù),客戶包括清華,北大 交大 復(fù)旦,中山等100多所大學(xué),ROCHE,阿斯利康,國藥 ,fisher等500多家公司

          6:我們*代理的品牌有:Antibody Research Corporation,arcticzymes,Biorelevant,AmberGen, Inc. ,clemente-associates,clodronaiposomes,Columbia Biosciences,enzyme research,Gene Bridges GmbH,Genovis,AmberGen, Inc.  Biotechnology GmbH,Haematologic Technologies HTI Haemtech,hookelabs,Immudex,Innovative Research of America,inspiralis ,List Biological Laboratories, Inc.,lumafluor,Microsurfaces,multiplicom,nanotools,Pel-Freez Biologicals,pentapharm,progen,Protein Ark,QA-Bio,Inc,QA-Bio,IncQuickZyme Biosciences,Teknova,TriLink BioTechnologies, Inc.,Zyagen Laboratories 等

          7:我們還是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批發(fā),歡迎合作。

          上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
          地址:上海浦東川沙鎮(zhèn)川沙路6619號(hào)上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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