GMP級(jí)干細(xì)胞凍存液

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司amsbio專業(yè)代理，AMSBIO成立于1987年，公司由艾倫和亞歷克斯聯(lián)合創(chuàng)立，總部位于西班牙馬德里，AMSBIO在意大利，瑞士和英國(guó)均有辦事處。AMSBIO的使命是成為一個(gè)生命科學(xué)研究的試劑和服務(wù)幫助客戶開發(fā)創(chuàng)新的方法，過程，產(chǎn)品和藥品的首要供應(yīng)商，為學(xué)術(shù)團(tuán)體和生物技術(shù)合作伙伴提供的技術(shù)和成本有效的解決方案。

Amsbio  STEM-CELLBANKER® 說明書

品牌：Amsbio

貨號(hào)： 11897 

品名： STEM-CELLBANKER

描述：GMP Grade Stem Cell Cryopreservation Media

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

STEM-CELLBANKER ^®是GMP下生產(chǎn)的ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞凍存液 產(chǎn)品特點(diǎn)是化學(xué)成分清晰，無動(dòng)物源成分，專門針對(duì)ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞特點(diǎn)設(shè)計(jì)的細(xì)胞凍存液

·  化學(xué)成分清楚和無動(dòng)物源成分

·  按照日本，歐盟，美國(guó)和PIC / S GMP指南生產(chǎn)

·  復(fù)蘇后保持細(xì)胞的高活力

·  解凍復(fù)蘇后依然保持干細(xì)胞的多能性

·  實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的長(zhǎng)期凍存，不管是-80度還是液氮保存都可以保證活性10年以上

·  可以不需要液氮就可以長(zhǎng)期保存

·  同樣可以適合組織冷凍保存及其他珍貴細(xì)胞凍存

·  STEM-CELLBANKER 已經(jīng)得到美國(guó)食品藥物管理局的認(rèn)證（生物制品評(píng)價(jià)和研究中心）

STEM-CELLBANKER ^®是*無的血清和動(dòng)物源性成分的，所有成分*歐洲藥典或美國(guó)藥典的要求， 是干細(xì)胞治療和應(yīng)用zui合適的細(xì)胞凍存液，STEM-CELLBANKER ^®使用方便，不需要特殊設(shè)備和儀器就可以實(shí)現(xiàn)干細(xì)胞高存活率的凍存和長(zhǎng)達(dá)10年以上的長(zhǎng)期保存。

STEM-CELLBANKER ^®還顯著增加細(xì)胞活力，同時(shí)保持細(xì)胞多能性，和細(xì)胞的正常核型和增殖能力，是一般凍存液無法達(dá)到的。

應(yīng)用實(shí)例

使用STEM-CELLBANKER對(duì)人體胚胎干細(xì)胞（hESC） 和誘導(dǎo)多能（iPS）干細(xì)胞進(jìn)行實(shí)際凍存測(cè)試。

測(cè)試凍存液：STEM-CELLBANKER凍存液 vs 常規(guī)細(xì)胞凍存液（細(xì)胞培養(yǎng)基 + 10% DMSO + 血清代替品）
細(xì)胞存活率評(píng)估方法：trypan Blue 和 Live/Dead assay kit試劑盒

測(cè)試結(jié)果：使用STEM-CELLBANKER凍存液的細(xì)胞存活率明顯提高，HS293, HS306 and ChiPSA 分別高達(dá)９３%、９６%　和９０％，比只有５０％存活率的常規(guī)細(xì)胞凍存液高一倍。同時(shí)，結(jié)果也顯示STEM-CELLBANKER凍存液沒有給細(xì)胞的增殖、分化和染色體組形帶來影響。

STEM-CELLBANKER用于小鼠腎臟組織凍存比較圖：

圖2.將小鼠腎臟切碎成約5平方毫米。將組織樣品或者立即固定用10％福爾馬林或冷凍保存與在-801毫升STEM-CELLBANKER的^ø C一周。冷凍保存的樣品在解凍后立即用10％福爾馬林固定。兩種樣品的石蠟切片用H＆E或抗活性半胱天冬酶3抗體染色。在新鮮和冷凍保存的組織樣品中，壞死或細(xì)胞凋亡的跡象都可以忽略不計(jì)。在來自各種小鼠器官的組織樣品的情況下獲得了類似的結(jié)果。

STEM-CELLBANKER保存的細(xì)胞MRNA保存水平圖

圖3.總RNA從小鼠肺成纖維細(xì)胞系的任收獲后立即或在-80與STEM-CELLBANKER凍存后的細(xì)胞中提取^ø C一周和解凍。通過DNA微陣列分析比較兩個(gè)樣品中的mRNA水平，結(jié)果顯示93％的mRNA在±1.6倍差異的范圍內(nèi)。

 使用STEM-CELLBANKER小鼠胚胎干細(xì)胞（129SV）進(jìn)行實(shí)際凍存測(cè)試。

細(xì)胞株：129SV (Mouse ES cell) 
測(cè)試凍存液：ZENOAQ 產(chǎn)品（CELLBANKER 1, 1plus, 2 和 STEM-CELLBANKER）
常規(guī)自培凍存液（90% FBS+10%DMSO 和 90% culture medium + 10%DMSO

操作流程圖：

使用手冊(cè):

細(xì)胞冷凍保存方法

選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)數(shù)的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。

1.    按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。

2.    按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù)。
（參考：5×105 至 5×106 cells/ml）。

3.    取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)。移去離心管中的上清液。

4.    加入適量的CELLBANKER? 細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度為 5×105 至 5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細(xì)胞混合液。

5.    將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示*的冷凍保存管中。

6.    直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長(zhǎng)期冷凍保存。

7.    若研究者需要液氮保存時(shí)，可將*凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法

1.    從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃ 振動(dòng)水浴槽中快速解凍。

2.    待凍存管中細(xì)胞混合液*融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。

3.    離心收集培養(yǎng)細(xì)胞((參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3至5分)，移去上清液。

4.    清洗細(xì)胞，充分洗凈殘留凍存液。

5.    加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。

6.    精檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

儲(chǔ)存方法和保質(zhì)期

儲(chǔ)存于４度以下。 保質(zhì)期３年。3個(gè)月以上沒有使用CELLBANKER凍存液的計(jì)劃時(shí)，盡可能冷凍保存。為避免重復(fù)凍結(jié)-解凍過程可能導(dǎo)致的CELLBANKER品質(zhì)下降和性能降低，推薦將 100mL 產(chǎn)品分裝小瓶后，再存放于 4℃以下或－20℃冰箱凍存。

質(zhì)量保障承諾

1.    STEM-CELLBANKER 細(xì)胞凍存液經(jīng)過嚴(yán)格內(nèi)毒素、pH、滲透壓和微生物檢查，確保產(chǎn)品不含細(xì)菌、霉菌以及支原體。

2.    使用小鼠胚胎干細(xì)胞（Mouse ES Cells）、Jurkat　和SK-007細(xì)胞驗(yàn)證性能測(cè)試凍存細(xì)保存活率達(dá)８０％以上．

注意事項(xiàng)

1.    CELLBANKER系列產(chǎn)品只供實(shí)驗(yàn)室研究使用，是試劑級(jí)產(chǎn)品。

2.    我們推薦用戶在使用本產(chǎn)品之前，事先對(duì)所使用的細(xì)胞進(jìn)行至少為期 1 周的
試驗(yàn)性細(xì)胞冷凍保存培養(yǎng)。確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。

3.    免責(zé)聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時(shí)所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)。

amsbio 其它產(chǎn)品信息：

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

1：強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。

2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營(yíng)超過700多個(gè)品牌，基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。

3：提供加急服務(wù)，貨品一般1-2周到貨。

4：富有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格優(yōu)勢(shì)，絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì)。

5：多年積累良好的信譽(yù)，大部分客戶提供貨到付款服務(wù)。客戶包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、國(guó)藥、fisher等藥企。

6：我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等幾十家國(guó)外公司授權(quán)代理。

7：我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批發(fā)，歡迎合作。