Formedium植物媒介促進(jìn)大腸桿菌培養(yǎng)

Formedium在其培養(yǎng)基中添加了六種植物培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)大腸桿菌。在所有六種植物培養(yǎng)基中，對(duì)于以下LB Miller培養(yǎng)基，LB Lennox培養(yǎng)基和2YT培養(yǎng)基的配方，胰蛋白胨已被大豆蛋白胨替代。胰蛋白胨和酵母提取物作為生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)表達(dá)的一般氮源存在。兩者都是氮的*來(lái)源，另外酵母提取物提供B型維生素，碳水化合物和生長(zhǎng)因子。

在植物培養(yǎng)基中，因此避免了用動(dòng)物來(lái)源的成分污染培養(yǎng)基，用大豆蛋白胨代替胰蛋白胨。與作為牛奶酪蛋白的胰腺消化物的胰蛋白胨相反，其替代大豆蛋白胨通過(guò)大豆粉的Papaic水解制備。與胰蛋白胨相比，大豆蛋白胨的氮含量（9.5％）略低，其氨基氮含量（3％）相同。這種差異小于2％，并且不會(huì)顯著影響生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)表達(dá)。

使用胰蛋白胨作為氮源和大豆蛋白胨作為替代來(lái)源的比較研究顯示生長(zhǎng)沒(méi)有差異。

在液體培養(yǎng)基中，通過(guò)680nm處的光密度測(cè)量大腸桿菌的細(xì)胞生長(zhǎng)，這在LB Miller Broth，LB Lennox Broth和含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的2YT肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線之間未顯示任何顯著差異。
在LB Lennox Agar的菌落形成單位（CFU）的固體培養(yǎng)基計(jì)數(shù)中，含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的LB Miller瓊脂和2YT瓊脂彼此沒(méi)有顯著差異。

含有大豆蛋白胨和胰蛋白胨的培養(yǎng)基之間沒(méi)有顯著差異。與在液體和固體培養(yǎng)基中使用胰蛋白胨相比，大豆蛋白胨也表現(xiàn)良好。

在所有三種培養(yǎng)基LB Miller Vegetal培養(yǎng)基，LB Lennox Vegetal培養(yǎng)基和包含大豆蛋白胨的2YT植物培養(yǎng)基中，不存在動(dòng)物來(lái)源的成分。由于沒(méi)有動(dòng)物源組件Formedium證明;

• 在本產(chǎn)品的制造過(guò)程中，不使用源自動(dòng)物或來(lái)自動(dòng)物的原料。
• 生產(chǎn)中使用的材料符合經(jīng)指令1999/82 / EC修訂的歐洲指令75/318 / EEC。

因此，F(xiàn)ormedium Ltd.認(rèn)為該產(chǎn)品在牛海綿狀腦病（BSE）或傳染性海綿狀腦?。═SE）方面沒(méi)有任何風(fēng)險(xiǎn)。

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方法：
肉湯培養(yǎng)：在LB Lennox，LB Miller和2YT培養(yǎng)基中測(cè)量細(xì)胞生長(zhǎng)。
每種培養(yǎng)基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制劑中。

• 將單菌落在5ml所有三種培養(yǎng)基中孵育（3胰蛋白胨對(duì)3大豆蛋白胨）O / N在37℃，180rpm。
• 在第1天：100稀釋后，在150ml燒瓶中培養(yǎng)30ml，溫度為37℃，180rpm。通過(guò)每小時(shí)測(cè)量的680nm的光密度測(cè)量生長(zhǎng)
• 3生物重復(fù)
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 5. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 10. 
  2YT; （克/升）; 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16，酵母提取物10，NaCl 5。

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方法：
平板上的瓊脂培養(yǎng)：在LB Lennox，LB Miller和2YT瓊脂平板上測(cè)量菌落形成單位的數(shù)量。
每種培養(yǎng)基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制劑中。

• 將單菌落在5ml所有三種培養(yǎng)基中孵育（3胰蛋白胨對(duì)3大豆蛋白胨）O / N在37℃，180rpm。
• 第100天，將100μl10倍稀釋系列（至10-6）涂布在與瓊脂相同的培養(yǎng)基上（例如，Miller肉湯菌落到Miller瓊脂上，Lennox-Soya菌落到Lennox-Soya瓊脂上）。在37°C下孵育O / N.
• 3個(gè)生物重復(fù)的菌落計(jì)數(shù)（cfu / ml）
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 5，瓊脂15. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 10，瓊脂
  15。2YT; （克/升）; 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16，酵母提取物10，NaCl 5，瓊脂15。

VLB-Broth Lennox

將20克粉末介質(zhì)懸浮在1升蒸餾水中，在室溫下干燥。