OncoImmunin專(zhuān)有技術(shù)

目標(biāo)：	解決方案：
與細(xì)胞凋亡，細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性，自噬，轉(zhuǎn)移，炎癥和病毒感染性有關(guān)的蛋白酶的肽底物。	新型的細(xì)胞和組織可滲透的熒光底物，可接觸活細(xì)胞和組織的所有環(huán)境。
診斷細(xì)胞凋亡，細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性，自噬，轉(zhuǎn)移，炎癥和病毒感染性。
細(xì)胞和組織可滲透抑制劑，可抑制細(xì)胞凋亡，自噬，轉(zhuǎn)移，炎癥和病毒感染。	對(duì)細(xì)胞和組織可滲透底物的OncoImmunin設(shè)計(jì)的修改：蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)上不可裂解的鍵的取代
藥物輸送車(chē)	使用OncoImmunin的分子設(shè)計(jì)可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞和組織的通透性
將寡核苷酸引入活細(xì)胞和動(dòng)物，特別是人類(lèi)，而不會(huì)造成損害，傷害或毒性。

與其他熒光底物相比，OncoImmunin蛋白酶底物的優(yōu)勢(shì)是4倍：

	選擇熒光探針以確保不僅在溶液中而且在生物學(xué)樣品（例如血清，活細(xì)胞和組織）中準(zhǔn)確測(cè)定酶活性。
	可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白酶的活性-無(wú)需任何修改！
	為了確保特異性，所有底物均包含來(lái)自切割位點(diǎn)兩側(cè)的氨基酸序列，即從P n至P n '。
	底物在溶液中呈環(huán)狀構(gòu)象，可模仿天然存在的靶分子的活性位點(diǎn)環(huán)狀構(gòu)象。

注-吸收率測(cè)量也是可能的。

要了解有關(guān)OncoImmunin，Inc.及其酶活性測(cè)定試劑盒的更多信息，請(qǐng)從下面的類(lèi)別中進(jìn)行選擇：

	原理：熒光團(tuán)的選擇；底物設(shè)計(jì)和切割；顯微鏡檢查
	彈性蛋白酶底物：溶液測(cè)量；全細(xì)胞應(yīng)用
	細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒：caspase-3（CPP32）和ICE；流式細(xì)胞儀 微粒
	快來(lái)了！-用于鈣蛋白酶，纖溶酶原激活物和Xa因子的檢測(cè)試劑盒

熒光團(tuán)的選擇

進(jìn)行熒光團(tuán)的選擇，使得激發(fā)和發(fā)射都在可見(jiàn)波長(zhǎng)范圍內(nèi)。選擇這種特定染料的理由是，生物材料包含在紫外線波長(zhǎng)域中既吸收又發(fā)出熒光的分子。這種自發(fā)熒光會(huì)阻礙樣品中少量活性的測(cè)定，并降低活性測(cè)定的可靠性。

基板設(shè)計(jì)和計(jì)算機(jī)建模結(jié)構(gòu)

肽底物與共價(jià)偶聯(lián)的熒光團(tuán)合成。后者在策略上遠(yuǎn)離靶序列，以確保不干擾蛋白水解切割。

彈性蛋白酶底物的代表性計(jì)算機(jī)模型結(jié)構(gòu)如下所示，其中黃帶代表肽主鏈構(gòu)象，青色代表附著的熒光團(tuán)。綠色箭頭表示切割位點(diǎn)。

顯示了該肽的兩個(gè)不同視圖。

 注意：首先，肽主鏈具有類(lèi)似于
 SERPINs反應(yīng)位點(diǎn)環(huán)中發(fā)現(xiàn)的環(huán)構(gòu)象。

 第二，青色染料部分形成二聚體。這進(jìn)一步穩(wěn)定
 了肽主鏈構(gòu)象。可以
 通過(guò)形成非熒光基態(tài)二聚體來(lái)適合地描述這種分子構(gòu)型。

卵裂誘導(dǎo)的熒光和吸收變化

在完整的肽中，青色熒光團(tuán)形成基態(tài)二聚體。該基態(tài)二聚體的吸收光譜可以用激子理論來(lái)適合地描述。肽裂解消除了這種染料與染料的相互作用，并導(dǎo)致熒光增加和吸收變化顯著。

該彈性蛋白酶測(cè)定法可在多種條件下工作。在溶液或細(xì)胞懸液中進(jìn)行測(cè)定。即使在顯微鏡下！

例如，一種應(yīng)用是使用熒光酶標(biāo)儀篩選抗炎藥候選物。用豬胰彈性蛋白酶測(cè)定的該底物的Km在800 nM范圍內(nèi)，而其他基于pNA和AMC生色團(tuán)的生色底物的Km值分別為6.2和0.8 mM [請(qǐng)參見(jiàn)MJ Castillo，K. Nakajima，M [Zimmerman and JC Powers Anal Biochem 99：53-64（1979）]。

當(dāng)您認(rèn)為現(xiàn)在可以在您認(rèn)為不可能的條件下測(cè)量彈性蛋白酶活性時(shí)，這確實(shí)是技術(shù)驅(qū)動(dòng)型科學(xué)的一個(gè)例子。

沒(méi)有其他彈性蛋白酶檢測(cè)法是喜歡的！

敏感 - 與公里在NM-800，這是熒光，所有后
廣泛適用的 - 澄清溶液，血清，細(xì)胞懸浮液，或在顯微鏡載玻片上

從下面的應(yīng)用筆記中選擇：

溶液測(cè)量
全細(xì)胞

您也可以將這些熒光底物用于：

1. 流式細(xì)胞儀分析
2. 組織學(xué)冰凍切片

帶有支持?jǐn)?shù)據(jù)的應(yīng)用筆記即將發(fā)布

要求特殊的介紹價(jià)格。
PhiPhiLux ^®是美國(guó)專(zhuān)有技術(shù); 其他美國(guó)專(zhuān)有技術(shù)和PCT申請(qǐng)正在申請(qǐng)中。

與OncoImmunin的CaspaLux ^® 基材，胱天蛋白酶的-1,6,8和活動(dòng)-9可以被測(cè)量。此外，通過(guò)以互補(bǔ)色組合5種不同的底物，可同時(shí)通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)和顯微鏡在活細(xì)胞中確定多種caspase活性。高通量分析也是可用的。 

半胱天冬酶具有細(xì)胞滲透性的熒光底物有兩種顏色：（單擊圖標(biāo)可下載協(xié)議） 半胱天冬酶 綠色 紅色 半胱天冬酶1 CaspaLux ® -1 -電子1 d 2 CaspaLux ® -1 -電子2d 2 半胱天冬酶6 CaspaLux ® -6 - J 1 d 2 CaspaLux ® -6 - J 2 d 2 半胱天冬酶8 CaspaLux ® -8 L - 1 d 2 CaspaLux ® -8 L - 2 d 2 半胱天冬酶9 CaspaLux ® -9 -中號(hào)1 d 2 CaspaLux ® -9 -中號(hào)2d 2