westbioscience大腸桿菌系統的優缺點

所有West Bioscience定制的蛋白表達和純化均在我們的加利福尼亞工廠進行，以確保高的質量和的客戶滿意度。我們一直是提供高質量重組蛋白表達和純化服務的，尤其是在定制蛋白設計領域。我們向客戶交付了數千種蛋白質。

 westbioscience大腸桿菌系統的優缺點

 優點

• 表達水平可能很高
• 低成本
• 快速增長
• 可擴展
• 簡單的轉換協議
• 可以更改許多參數以優化表達式

 缺點

• 低效的二硫鍵形成
• 蛋白在細胞質中折疊不良
• 包涵體形成
• 體外重折疊方案效率低下–可能會抵消優勢
• 密碼子的用法不同于真核生物
• 少的翻譯后修飾
• 內毒素

克隆

我們將通過標準亞克隆或PCR克隆將您的插入片段克隆到表達載體中。  將用于將目的基因轉移到表達載體中。將對克隆進行*排序以進行驗證。

 表達篩選

含有目的基因的表達載體將被轉化到大腸桿菌的表達菌株中以產生蛋白質。幾個單獨的克隆將在小規模的誘導實驗中進行篩選。表達結果將通過SDS / PAGE和蛋白質印跡進行分析。

 表達優化

表達條件將通過誘導時間，溫度和培養基條件來優化。結果將通過SDS-PAGE和Western blot確認。

 蛋白質表征

將測試小規模的培養物，并對表達的蛋白質進行表征，以區分純化標簽的細胞位置，溶解度，產量和可及性。將設計生產和純化蛋白質的詳細策略。

 蛋白質生產

使用搖瓶將以升量進行大規模生產。如果您喜歡自己純化蛋白質，則將收到細胞沉淀物以及帶有SDS-PAGE和Western blot分析結果的完整報告。

 蛋白質純化

可以使用多種方法純化蛋白質，例如包涵體制備或親和柱純化。