德國Biontex轉染試劑簡介

德國Biontex轉染試劑簡介
Biontex 公司成立于1998年，其總部位于德國慕尼黑附近的Martinsried，專注于轉染試劑的研發和應用。

（一） K2^® Transfection System ，Biontex最新產品
全新高效的哺乳動物細胞DNA和mRNA轉染工具



產品特點：

真核細胞依賴自身的先天性免疫系統，能夠識別并抑制外來物質（如脂多糖、細菌、病毒核酸及蛋白質）的入侵。此外，細胞還可以將這些外來物質的信息通過信號分子傳導給相鄰的細胞，使這些臨近細胞在無需接觸病原體的情況下產生防御體系。
為降低細胞自身的免疫反應，提高基因轉染效率，Biontex公司最新開發了K2® Transfection System，由K2^® Transfection Reagent 和 K2^® Multiplier兩部分組成。K2^® Transfection Reagent是一種高效的陽離子脂質，而K2^®Multiplier則可以降低細胞對外來核酸及脂質體的免疫反應。

應用實例1：

K2轉染pCMV-GFP的效率® 轉染系統和Metafectene Pro與幾種細胞系的市售轉染試劑L2k進行了比較。

應用實例2：


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（二）METAFECTENE^® SI⁺
特別適合于siRNA或miRNA mimic/inhibitor的高效轉染試劑

特點:

METAFECTENE^® SI⁺是一種脂質復合物，經特殊優化適用于siRNA和microRNA轉染（siCOM技術），綜合了Biontex公司RMA和TOP技術的特點，具有沉默效率高、RNA聚合和毒性低等優點，適用于所有細胞系和原代細胞。

siCOM技術(siRNA adjusted Composition)
不同于一般的DNA轉染試劑，本技術不需要將siRNA和miRNA轉運到細胞核。因此，METAFECTENE^® SI⁺主要目的在于大化的內吞作用并快速*釋放RNA進入細胞質。

轉基因HeLa-GFP細胞GFP表達序列的研究® SI+和siRNA直接作用于GFP的mRNA。清晰可見的是GFP表達在72小時內下降到最大值。

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（三） METAFECTENE® EASY
更快、更簡便、更高效的轉染技術

特點：

在開發第二代DNA轉染試劑（METAFECTENE^®及其升級版本METAFECTENE^®PRO）的時候，Biontex的主要目標是大化轉染效率(RMA技術)和最小化毒性作用(TOP技術)。進一步開發的Biontex FEE技術預示著第三代質粒轉染試劑的開始：METAFECTENE^®EASY⁺。

FEE技術
FEE技術是優化的具更高轉染效率的技術，通過固定DNA /脂質體比率和轉染復合物體積而適用于廣泛的細胞類型。不需要針對每種細胞類型進行費時、費力的條件優化。

變質體® EASY的轉染效率與METAFECTENE相當® 無需優化DNA/脂質體（深藍色柱：COS-7，淺藍色柱：HeLa細胞）。

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（四）METAFECTENE^® PRO
真核細胞的高效、低毒性轉染試劑

METAFECTENE^® PRO是針對哺乳動物細胞的新一代轉染試劑。采用毒性優化技術（TOP技術），Biontex成功地降低了轉染試劑對細胞的毒性，并顯著提高DNA進入細胞的效率。除了能加強細胞的轉染效率之外，METAFECTENE^® PRO的另一個主要特點是提高細胞內基因的表達。


TOP技術(Toxicity Optimization Module)
毒性最小化是現代轉染試劑達到效率和廣泛應用性的首要前提條件。TOP技術的基本準則是模擬物質天然結構，加強生物降解能力，提高細胞耐受性。另外，通過物理化學修飾，降低脂質復合體的穩定性，從而促進DNA在細胞質的釋放。


METAFECTENE轉染效率的比較® PRO與各種細胞系（代謝物）® 100%)

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（五）METAFECTENE^®

RMA技術(Repulsive Membrane Acidolysis)
排斥膜酸水解（RMA）技術，一方面能促進細胞內涵體中“質子海綿”的活性，另一方面能促進脂質體復合物分解，通過小片段質子化結構模擬磷脂結構。當內涵體處于酸性環境時，正電荷累積在脂質體復合物的磷脂雙分子結構中，通過電荷的排斥力，這些電荷最終引起脂質體復合物的分解，同時高效地將DNA/RNA釋放到細胞質中。
最后，胞質中非絡合的DNA/RNA急劇增多，以DNA為例，這個結果導致其在胞質中的活性顯著提升，DNA與細胞核接觸的可能性增加，從而大大提高轉染效率。

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其他相關產品：

產品名稱	產品介紹	規格	貨號
METAFECTENE®FluoR	轉染全過程可視化 低毒性：維持細胞最佳形態 可使用顯微鏡觀察細胞密度 應用：轉染真核細胞	0.5 ml 1.0 ml	T050-0.5 T050-1.0
INSECTOGENE	簡便、高效地轉染昆蟲細胞生產重組蛋白； 與桿狀病毒表達系統兼容； 耐受血清抑制； 快速，操作簡便； 性價比高 應用：昆蟲細胞轉染	1 ml 2 X 1ml 5 X 1ml	T030-1.0 T030-2.0 T030-5.0
DOTAP	第一代轉染試劑 用于DNA或者反義核苷酸寡聚體轉染哺乳動物細胞。價格便宜，已被大量文獻報道。	1 ml 2 X 1ml 5 X 1ml	T010-1.0 T010-2.0 T010-5.0
PROTEOfectene®	快速、高效的蛋白轉染試劑 廣泛適用于各種蛋白質轉染和各種細胞類型 低毒性，耐受血清抑制	0.1 ml 0.25 ml 0.5 ml	E010-0.1 E010-0.25 E010-0.5
PROTEOfectene®AB	快速、高效的蛋白轉染試劑 廣泛適用于各種蛋白質轉染和各種細胞類型 低毒性，全血清耐受 具有所有同型抗原的單克隆/多克隆抗體	0.1 ml 0.25 ml 0.5 ml	E020-0.1 E020-0.25 E020-0.5

二、自主生產的轉染試劑：HTfect transfection kit

HTfect transfectionKit是盎然生物技術有限公司研發的一種高效、低毒、廉價且重復性好的新型轉染試劑，適用于大部分細胞類型。本產品特別適合于HEK293、HeLa、HT1080等細胞的轉染，在重組蛋白表達，病毒包裝， microRNA靶基因3’-UTR分析、co-IP等實驗中用途廣泛。同時，本產品也不受血清的干擾，實驗操作簡單。
產品優勢

使用實例
用HTfect transfection kit 將3 μgpLVX-cmyc-EGFP質粒轉染HEK293細胞，兩天后使用Olympus倒置熒光顯微鏡（IX71）進行觀察和拍照。（左圖為明場細胞圖像，右圖為綠色熒光細胞圖像）。


產品訂購信息：

• 1. 通過抑制細胞對外源DNA的免疫反應來提高轉染效率，特別適用于轉染人類細胞
  2. 多數情況下，比其他常見轉染試劑（如，Lip2K）有更高轉染效率
  3. 細胞毒性較低
  • 整合了RMA和TOP技術
  • 沉默效率更高，siRNA用量更少
  • 操作簡便、快速，適合大規模篩選
  1. 快速：一次轉染實驗只需3天
  2. 簡便：優化條件時，只需摸索兩個固定的 DNA:lipid比例
  3. 高效：升級產品提高了轉染效率，進一步降低毒性
  4. 經濟：EASY⁺的顯著特征，EASY⁺降低了核酸復合物(DNA +脂質)所需要的體積，節約至少50%的成本
  1. METAFECTENE^®是一種基于脂質體的包含陽離子和中性脂質的復合物，在DNA轉染哺乳動物細胞時達到很高的轉染效率。屬于第二代轉染試劑。
  2. RMA技術是高效轉染率的保證。另外，METAFECTENE^®的低毒性和耐受血清抑制等特性使其具有廣泛的應用空間。
  1. 轉染效率高，尤其對HEK293T細胞的轉染效率高達95%以上。
  2. 細胞毒性小，顯著低于L2K等試劑。
  3. 轉染過程中無需更換無血清培養液，操作簡單。
  4. 性價比高，特別適合大規模轉染實驗，如表達重組蛋白或者包裝病毒等。
  5. 結果重復性好。