advancedbiomatrix膠原酶簡介

advancedbiomatrix膠原酶簡介

產品描述

膠原酶由多種酶組成，包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶，旨在有效水解膠原蛋白和解離組織。已經評估了各種膠原酶產品專門用于 Advanced BioMatrix 的膠原蛋白產品。該產品用于提高消化膠原凝膠中分離細胞的活力和功能。

膠原酶以 50 mg 包裝大小的凍干無菌粉末形式提供。重構后，產品即可使用。

1. 使用這些建議作為指導來確定適合您的培養系統的最佳凝膠解離程序。

2. 在磷酸鹽緩沖鹽水或其他 pH 中性介質中重構凍干膠原酶粉末（50 毫克）。可以使用 1 mg/ml 的典型濃度。

3. 從膠原凝膠中吸出培養基。

4. 用預熱的 PBS 或其他 pH 中性培養基清洗膠原凝膠 2X，以去除可能抑制膠原降解的培養基。

5. 加入適量的膠原酶溶液（一個凝膠體積就足夠了）。例如：對于含有 0.5 ml 凝膠的 24 孔板，添加 0.5 ml 膠原酶溶液。

6. 轉移到 37oC 培養箱中 30-60 分鐘。為了促進膠原凝膠的更快解離，凝膠和膠原酶溶液可以使用大口徑移液器吸頭上下移液。

7. 如有必要，在 37°C 下再孵育 30-60 分鐘，以完成凝膠的消化。如果需要，每 15 分鐘移取一次凝膠/細胞混合物。注意：較厚的凝膠或含有較高濃度細胞的凝膠可能需要更多時間。

8. 凝膠*消化后，向凝膠/細胞混合物中加入等體積的*培養基，然后收集細胞。

9. 沖洗收集任何殘留細胞的培養容器。

10. 在室溫下以 250 xg 離心細胞懸液 5 分鐘。

11. 小心吸出上清液，將細胞沉淀重懸于 0.5 -1 ml 新鮮培養基中。

12. 使用血細胞計數器和臺盼藍確定細胞計數和活力。