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          重組豬源RNase抑制劑說明書

          更新時間:2023-04-21      點擊次數(shù):1471

          重組豬源RNase抑制劑說明書

          上海起發(fā)生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌,打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè),共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè),圓夢中國。

          產(chǎn)品詳情

          貨號

          規(guī)格

          價格

          78BAB10003-100uL

          100uL(4KU)

          200.00

          78BAB10003-1ml

          1ml (40KU)

          1600.00

          78BAB10003-50ml

          50ml (2MU)

          50000.00

          產(chǎn)品描述

          本產(chǎn)品是以大腸桿菌中進行表達,并通過親和層析純化的重組豬源RNase抑制劑,該蛋白特征與豬肝和人胎盤來源此類酶相似,可替代天然提取 RNase Inhibitor的應用。本產(chǎn)品與RNase A形成1: 1復合體,抑制RNase活性。該反應是可逆的,通過尿素及巰基類試劑能夠解離復合體,使RNase復性而抑制劑不可逆失活。本產(chǎn)品與其它競爭性抑制劑(核酸類,無機磷酸類)不同,可以很容易地通過苯酚處理將其從反應體系中除去,但不能抑制逆轉(zhuǎn)錄酶的RNase H的活性。使用時可直接加入含有RNA的反應液中用于cDNA第一鏈合成、體外轉(zhuǎn)錄和體外翻譯等實驗。

          產(chǎn)品特點

          ·     cDNA合成

          ·      體外轉(zhuǎn)錄

          ·      體外翻譯

          ·      1-Step RT-qPCR

          產(chǎn)品組分

          緩沖液成分:20 mM HEPES-KOH(pH 7.6),50mM KCl,8mM DTT,50% (v/v) glycerol。

          使用方法

          使用方法

          溫馨提示:需要用無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預混液

          1 cDNA合成

          (1)在無RNA酶的PCR管中配制RNA/引物預混液

          組分

          反應體積(10ul)

          Oligo(dT)20

          (或Random primer)

          (或基因特異引物)

          25pmoles

          (25pmoles)

          (5pmoles)

          10mM dNTPs

          2µL

          模板RNA

          2pg-5µg

          DNase/Rnase Free Water

          10ul

          2)65℃加熱5min,立即置于冰上

          組分

          反應體積(10ul)

          RNA引物預混液

          10ul

          5x RT Buffer

          4µL

          BIOHUB Reverse Transcritase

          1ul

          RNase inhibitor(40U/µL)

          1ul

          100mM DTT

          2ul

          DNase/Rnase Free Water

          補足20ul

          3)輕輕混勻,按如下反應條件設置

          逆轉(zhuǎn)錄反應條件

          1

          42℃

          20-60min

          2

          99℃

          5min

          備注:逆轉(zhuǎn)錄溫度可在42-60之間調(diào)整,反應時間建議在20-60min內(nèi)調(diào)整

           

          4)得到的cDNA溶液可以直接用于第二鏈cDNA合成及后續(xù)PCR反應。

          優(yōu)化參考方法

          優(yōu)化參數(shù)

          參考范圍

          逆轉(zhuǎn)錄

          50-60℃ 5-15min

          預變性溫度時間

          95-98℃ 10sec-5min

          變性溫度

          95-98℃ 3sec-10sec

          延伸/退火溫度

          60-65℃ 5sec-30sec

          注意事項

          1. 本產(chǎn)品在PH7?8時表現(xiàn)最佳抑制RNase活性。

          2. 本產(chǎn)品發(fā)揮活性作用至少添加1 mM的DTT。

          3. 本產(chǎn)品不抑制RNase H活性及逆轉(zhuǎn)錄酶活性。

          運輸及保存方法

          -20℃可保存12個月。



          上海起發(fā)實驗試劑有限公司
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