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          PAP(KlenTaq-S 測序酶)說明書

          更新時間:2023-06-05      點擊次數:1932

          PAP(KlenTaq-S 測序酶)說明書

          上海起發(fā)生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發(fā)實驗試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌,打造優(yōu)質的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時,把好生物產業(yè)鏈中的國產生物試劑品質關。未來讓每一個和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè),共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國生物制造企業(yè),圓夢中國。

          產品詳情

          貨號

          規(guī)格

          價格

          78BEA10012-250U

          250U

          870.00

          78BEA10012-1250U

          1250U

          3500.00

          78BEA10012-5000U

          5000U

          11300.00

          78BEA10012-12500U

          12500U

          26050.00

          產品詳情

          KlenTaq-S 測序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版,為 Taq DNA 聚合酶的大片段,并做了基因突變。本酶具有 5’→3’聚合酶活性,無5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶,KlenTaq-S 測序酶具有很強的 ddNTP 的滲入能力,因此其適用于終止法 DNA 測序或焦磷酸解反應 SNP 分析。

          本公司 KlenTaq-S 測序酶是重組表達,并經多步純化制備的重組蛋白。

          活性定義

          活性單位指在 72℃下, 1×AM PCR Buffer 130 min 內將 10 nmole dNTP 摻入酸不溶性物質所需的酶量。

          特點

          1.尤其適合 ddNTP 等修飾核苷酸的摻入反應

          2.相比全長 Taq DNA 聚合酶,本酶比活性有所降低

          適用范圍

          ddNTP 終止法DNA 測序(一代測序

          焦磷酸解反應延伸法 SNP 分析

          質量控制

          經過嚴格的質控檢測,確保該產品具有最高的活性和純度。

          酶貯存緩沖液

          20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

          應用舉例

          以下反應舉例為 50 μl 標準 PCR 體系,僅供參考。實際 PCR 條件應根據模板、引物、目的片段大小加以優(yōu)化,確定最佳反應條件。

          1 按下表配制反應體系

          組份

          體積/μl

          終濃度

          10×AM PCR Buffer 1

          5

          dNTPs2.0 mM

          5

          0.2 mM

          引物 F10 μM

          1.5

          0.3 μM

          引物R10 μM

          1.5

          0.3 μM

          Template

          Varable*

          /

          KlenTaq-S測序酶(5U/μl

          0.5

          2.5U

          ddH2O

          Varable

          /

          總體積

          50

          /

          *模板DNA用量參數(50 μl反應體系):

          人基因組DNA100-1000 ng ; 微生物基因組DNA 10-100ng;PCR產物 1 ng-10 ng Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

          2 按如下條件進行反應,

          95

          2-5 min


          95

          15 sec

          25-35 Cycles

          55~72

          20 sec

          72

          1kb/min

          72

          5 min


          3 瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR 產物,或按實驗目的進行后續(xù)操作。

          注意事項

          1.PCR 條件和野生型 Taq DNA 聚合酶類似,對特定 DNA 的測序反應可能需要優(yōu)化。

          2.本酶擴增能力較野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低,PCR 產量有所降低,不建議用于常規(guī) PCR

          3.不可用于 Taqman 探針法 q-PCR

          濃度

          5U/uL

          運輸與保存

          -20℃可保存 2 年,避免反復凍融



          上海起發(fā)實驗試劑有限公司
          地址:上海浦東川沙鎮(zhèn)川沙路6619號上海起發(fā)實驗試劑有限公司
          郵箱:xs1@78bio.com
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