防止RNA的降解

對于RNA的抽提質(zhì)量影響至關(guān)重要的幾個因素之一，是在RNA抽提之前如何處理樣本。

這里我們可以看到一個小鼠肝組織樣本在室溫下分別放置2小時，4小時，過夜之后提取的RNA電泳圖。RNA在未處理的樣本中很快就降解了。

你知道嗎？

內(nèi)源RNase量在不同種類組織中差異極大。腦組織和心組織擁有相對zui低的內(nèi)源RNase，胸腺組織和胰腺組織擁有比腦組織多100,000倍內(nèi)源RNase。

當你著手樣本破裂均漿時，請將以上因素考慮進去，能在獲得樣本的zui初時間將富含RNase的樣本放入RNAlater保存液，以便保存更少降解的樣本用于后繼破裂均漿。

保護樣本免于RNase困擾

RNAlater是一種液態(tài)，無毒的組織儲藏試劑，能夠迅速滲透組織來穩(wěn)定和保護細胞RNA。使用RNAlater您無需迅速處理組織樣品或液態(tài)凍結(jié)樣品以備后繼處理。組織切割后浸沒入RNAlater中儲藏，不會損害后繼RNA分步驟所獲得的RNA質(zhì)量和數(shù)量。

只需要方便地將樣品（組織、細胞、土壤、昆蟲、植物等等）侵入5-10倍體積的RNAlater也中保存，就可保護樣品內(nèi)RNA免于內(nèi)源RNAlater降解。大多數(shù)組織經(jīng)RNAlater處理后可以在室溫或低溫保存很長時間，在-20°C/-80°C甚至無限長。

提示

RNAlater是一種非特異的蛋白變性劑。在它的作用下不僅RNase被變性抑制從而保護RNA，Dnase/核酸聚合酶/大多數(shù)蛋白酶同時被變性抑制，因而同樣可以保護樣本中的DNA、表達譜和蛋白質(zhì)完整性。