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          血漿游離血紅蛋白測定

          更新時間:2013-10-25      點擊次數:3889

          實驗原理

            血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

          實驗方法

            材料:

            1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液

            2.1%H2O2

            3.10%醋酸溶液

            4.分光光度計

            方法:

            1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

            2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。

          試劑 (ml)

          測定管

          空白管

          2 g/L鄰甲聯苯胺溶液

          0.5

          0.5

          患者血漿

          0.02

          /

          1% H2O2

          0.5

          0.5

          混勻后室溫放置10min

          10%醋酸溶液

          5.0

          5.0

          室溫放置10min

            3.計算公式

            血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100

          實驗結果計算

            參考范圍:0-40mg/L

          注意事項

            1.一切容器避免血紅蛋白污染;

            2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;

            3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;

            4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

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