Lysyl EndopeptidaseR, Mass Spectrometry Grade

??產品基礎信息  

貨號：123175-82-6

英文名：Lysyl EndopeptidaseR, Mass Spectrometry Grade (Lys-C)  

中文名：賴氨酰肽鏈內切酶，質譜級  

品牌：FUJIFILM Wako（富士膠片和光）  

規格：常見為20 μg/支（可組合購買多支裝）  

儲存條件：-20℃干燥保存，避免反復凍融  

分子量：約30,000 Da（SDS-PAGE檢測）  

活性單位：≥0.03 AU/vial（30℃, pH9.5條件下每分鐘催化生成1 μmol對硝基苯胺）  

??詳細介紹  

1?? 來源與特性  

Wako Lys-C酶源自無色桿菌（Achromobacter lyticus），通過基因重組技術實現高純度表達。作為氨酸蛋白酶家族成員，其最適pH為9.0-9.5，等電點6.9-7.0，能在含尿素（4M）或SDS（0.1%）的變性環境中保持穩定活性。  

2?? 作用機制  

該酶特異性切割賴氨酸（Lys）殘基的C端肽鍵，對鄰近氨基酸序列無顯著偏好性（如Pro殘基可能抑制切割）。與Trypsin聯用時，可顯著提升蛋白質的酶解覆蓋率，尤其適用于膜蛋白、復雜組蛋白等難消化樣本。  

3?? 應用場景  

- 蛋白質組學研究：用于肽段制備，輔助質譜鑒定翻譯后修飾（如磷酸化、泛素化）  

- 生物制藥開發：單克隆抗體鉸鏈區切割、重組蛋白質量控制  

- 基因編輯驗證：CRISPR相關蛋白的純化與功能分析  

- 交聯質譜（XL-MS）：解析蛋白質三維結構及相互作用網絡  

??核心優勢詳解  

? 高特異性與低自切活性  

Lys-C僅識別賴氨酸C端，錯誤裂解率低于3%（Trypsin單獨使用為8%），顯著提升質譜數據可靠性。  

? 低劣條件耐受性  

在pH4.0-11.0、30℃環境下穩定保存，50℃以上活性下降但仍優于同類產品。  

? 靈活的樣本兼容性  

支持凝膠內酶切、溶液內酶切等多種模式，尤其適合SDS-PAGE膠回收樣本的消化。  

? 批次一致性保障  

采用大腸桿菌重組表達技術，通過ISO9001和ISO/IEC17025認證，批間差異<5%。  

? 經濟高效的包裝設計  

20 μg/支的小包裝設計減少浪費，單支可完成100-200個樣品的酶切。  

?購買常見問題與解答  

Q1：Lys-C與Trypsin聯用比例如何確定？  

A：推薦比例為1:50（Lys-C:Trypsin），具體需根據樣本類型優化。  

Q2：酶切后肽段如何純化？  

A：建議使用ZipTip或C18固相萃取柱脫鹽，再通過質譜分析。  

Q3：能否用于磷酸化蛋白分析？  

A：可以！Lys-C不會切割磷酸化位點，是磷酸化研究的理想選擇。  

Q4：長期保存是否需要添加穩定劑？  

A：無需額外添加，凍干粉在-20℃可穩定保存2年。  

Q5：與競品（如Thermo Fisher Lys-C）相比有何優勢？  

A：Wako Lys-C純度更高（SDS-PAGE單一條帶），且提供更靈活的包裝規格。

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